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检测服务中值得重视的几个问题

2018/8/24 16:25:53 0人评论 1491次浏览 分类:实验室诊断

鸡鸭鹅病防治网联合驰骋祥兽医研究所共同分享:

检测技术和检测平台的普及,可以给养殖业提供准确的数据信息,指导实际生产。但是,数据向生产转化的过程中有一些值得重视的问题,明确这些问题才能使检测数据更准确的服务于养殖生产。

1、根据现场状况和疑似方向确定检测方法

检测方法是需要根据现场问题和疑似方向而确定检测目的的技术手段。所以现场状况是基础,疑似方向是目标,检测方法是手段。一般来讲,在疾病早期可采集疑似疾病的靶器官进行病原学检测,在疾病中晚期病原分离率不高的情况下可采用血清学检测。

1)对于低日龄鸡只采取病原学检测时,一定要了解鸡群相应疾病活疫苗免疫时间和毒株、用药治疗等情况,避免出现因苗毒造成的假阳性,也可采用特异性引物扩增或扩增产物测序比对等方法区分疫苗毒株和野毒株。

2)采取血清学检测抗体时,一定了解相应疾病免疫背景、病程,通过检测值和离散度分布情况,初步判断免疫效果、疾病感染状态和感染时间。

例如现场鸡群在30-80天出现消瘦瘸腿现象而临床诊断不清晰时,需要借助实验室检测的途径。消瘦瘸腿是现场问题(基础),疑似方向是马立克氏病和滑液囊支原体(目标),根据现场鸡群病程、免疫情况、日龄等确定检测方法。

采取病原学检测时一定了解鸡群是否做过马立克活苗和滑液囊支原体活疫苗,避免出现疫苗毒引起结果假阳性,可通过特异性序列扩增或对扩增物测序比对区分疫苗毒株还是野毒株。对于马立克即使检测到野毒株感染也不能断定是马立克氏病,因为隐形感染不一定引起临床症状,临床发病需要病原体感染、感染性病原体达到一定数量才可以引发临床症状。需进一步通过病理学确定组织病变是否是由马立克病毒引起才能确诊。

采取血清学检测可根据鸡群日龄和抗体值匹配度,判断免疫效果或是否野毒感染,根据抗体离散度判断感染时间的长短等信息。滑液囊支原体育成期ELISA值在8000以上可判为阳性,抗体值离散度较大可能处于感染过程中,抗体值较高且离散度较小可能处于感染中后期。

3)由于PCR方法灵敏度较高,实验过程一定要设阳性、阴性和空白对照;血清学检测中也要注意非特异性交叉反应现象的存在。

2、根据检测方法科学收集病料

对于群体养殖来讲,采样必须具有代表性。病料采取不当,不但不能检出真正病原体,而且可能由于病料污染其他病原体而造成误诊。一般采取疾病流行早期的新鲜有代表性病变明显的组织器官,然后低温下保存和运输。对于病理组织学检测的病料,应在不破坏其结构的情况下采集并置于10%福尔马林液里固定。


采集后血样在一次性注射器内或沿壁缓慢注入离心管后,竖直静置于25-37℃下10-30分钟,待血液凝固血清析出后4℃冷藏保存或运输。采集血样不能冷冻, 析出血清前不能震荡和摇晃。

(2)血清学检测血清采集

3、科学准确判断检测结果才是最重要的

检测报告分析一定要将临床症状、样品背景和检测方法的判定标准相结合。病原学检测的目的在于发现传染源,从淘汰传染源、切断传播途径和免疫保护易感鸡群方面入手控制疾病;血清学检测的目的在于预防检测和健康评估,对于制定和调整免疫程序有重要意义。当检测数据与临床不符时,要从样品采集、样品送检、检测方法、检测操作等多环节分析。

检测是一个连续性工作,单一一次检测意义不大。无论病原学还是血清学检测都是一个随鸡群日龄和免疫、感染状态变化而变化的动态趋势。尤其对于具有免疫逃逸机制的病原来讲,更要结合临床症状、病程变化等确定检测方法和科学分析判读检测数据。

例如30日龄雏鸡和120日龄成鸡的新城疫抗体HI值均为10,代表的鸡群状态是不一样的;1日龄免疫马立克疫苗,30日龄常规PCR检测阳性可能是疫苗毒所致;雏鸡早期感染传支造成“假母鸡”后,成鸡阶段在使用病原学检测传支病毒分离率很低,此时可用血清学方法。

所以科学判读检测结果需要了解临床症状、免疫状态、鸡群日龄、用药情况、采样样品背景、检测方法、检测试剂、判定标准等详细信息,否则监测数据很难真实反映现场状态。

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