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鸽新城疫是由副粘病毒科鸽Ⅰ型副粘病毒感染引起的,可致鸽食欲减退、下痢和神经症状为主要特征的一种急性、热性传染病,是危害鸽的主要疫病之一。该病1985年传入中国香港,随后在广东不断蔓延,并向周边省份扩散,至今该病已遍及我国绝大多数养鸽地区。现在国内鸽场多用免疫鸡新城疫Ⅳ系(La Sota)活疫苗来预防该病,能起到一定的保护作用,但也会出现免疫失败导致鸽群发病的情况。
2017年12月,江苏省某鸽场的鸽群发病,出现精神沉郁,采食下降,个别鸽子出现拉绿色稀粪和扭头等症状。该鸽场针对新城疫的免疫是每三个月饮水免疫鸡新城疫Ⅳ系(La Sota)活疫苗4羽份,而没有进行新城疫油苗的免疫,这次发病时间刚好在常规免疫的前两周。根据这次鸽群发病症状,以及疾病传播速度快和死淘率高等流行病学特点,怀疑为新城疫病毒感染。
采集该发病鸽场10只有神经症状的鸽子的肺脏、气管和大脑等组织器官,将病料混合接种于SPF鸡胚尿囊腔。收获死亡鸡胚和冻死鸡胚尿囊液,并进行血凝试验(HA),血凝抑制试验(HI),RT-PCR检测和序列测定。
将病料研磨过滤后,在无菌环境下无菌操作接种10日龄SPF鸡胚,接种后置于37℃孵化箱内孵化,68小时后鸡胚逐渐开始死亡,表现为全身出血,其中以头部、颈部及脚部等出血最为明显(见图1)。
图1 接种JSP株68小时后SPF鸡胚情况
注:(左对照组,右感染组)
收获的鸡胚尿囊液对鸡红细胞具有血凝性,其血凝效价为7~8孔。用新城疫、禽流感与减蛋综合征等病毒的标准阳性血清对收获的病毒液进行血凝抑制试验(HI),其对新城疫标准阳性血清的HI效价为1:512,其余的则皆小于1:2,因此病料分离培养后获得的病毒液是新城疫病毒,将其命名为JSP株。
对JSP株进行RT-PCR检测,在完成对扩增产物的电泳检测之后,获得的目的片段和预期基本一致(见图2)。序列测定结果显示,JSP株的F基因由1792个核苷酸组成,含有一个长度为1662个核苷酸的完整ORF,预计编码553个氨基酸。F0裂解位点的氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,有多个碱性氨基酸的插入,具有新城疫强毒的典型分子特征。目前分离得到的鸽源新城疫病毒,是鸡新城疫病毒长期适应鸽体内环境,并在鸽体内发生变异所导致的,其F0裂解位点的氨基酸序列多为112R-R-Q-K-R-F117,因此鸽源新城疫病毒的生物学特性不一定与其F蛋白裂解位点的氨基酸序列表现一致,也就是F蛋白裂解位点的特征性结构不完全决定鸽新城疫的毒力。比较La Sota疫苗株与JSP分离株, 发现该分离株HN基因发生E347G的突变。HN蛋白基因氨基酸的第345~353位具备线性抗原表位,每个氨基酸发生改变都会使得抗体无法对病毒进行准确识别,出现免疫逃避的风险,从而降低疫苗的保护力。
图2 分离株RT-PCR扩增产物
注:1为分离株(JSP)基因F的RT-PCR扩增产物,2为分离株(JSP)HN基因分离株F的RT-PCR扩增产物,M为DNA Marker DL2000
而基于JSP株F基因47~421共375bp核苷酸序列,利用MEGA7.0软件绘制系统进化树(见图3,圆形符号为分离株;正方形符号为常用代表毒株)。遗传分析结果表明,JSP株属于基因Ⅵ型,与Pi/SH/CH/0168/2013株(登录号:KT163263)的亲缘关系最近,处于同一进化分支。目前国内鸽群流行的新城疫病毒以基因Ⅵ型为主,但使用的新城疫疫苗毒株主要有La Sota株、B1株等,用于疫苗效力检验的F48E9等毒株都不是基因Ⅵ型。鸽群中流行毒株氨基酸突变的积累,导致流行毒株与疫苗毒株之间的氨基酸序列出现了明显的差异,两者抗原识别位点发生变化,而基因Ⅵ型新城疫病毒对鸽子的特殊嗜性,使得现阶段使用的疫苗株无法实现100%保护。
图3分离株(JSP)的F基因的系统进化树
注:圆形符号为分离的JSP株,正方形符号分别为常用代表毒株B1、La Sota、Mukteswar和疫苗效检株F48E9
预防鸽的新城疫,仅用La Sota活疫苗,常会出现一些非典型的新城疫症状或长期排毒等情况,加快病毒变异的速度。而免疫空档期长、生产管理不到位的鸽场,往往发病更为严重,因此,加强对养殖场人流物流的控制以及加强环境消毒,对于现阶段鸽场防控新城疫是有效的措施。而将鸡新城疫Ⅳ系(La Sota株)弱毒活苗和灭活油苗有机结合起来使用,使鸽子的细胞免疫和体液免疫同时激活,产生更高更持久的抗体,也是提高鸽群对新城疫野毒抵抗力的有效方法之一。
治疗方案:
第一阶段:
主要以抗病毒,和抗菌药为主,配合消炎药。治疗用药是驰骋芪贞颗粒8包/天+好得快8瓶/天+新力爽6包/天。
第二阶段:
主要以恢复鸡体抗体水平和肝脏的恢复为主,让鸽群处于最健康的状态。保持良好的产蛋,给养殖户带来最大的经济效益。
用药方案为:生命核能+驰骋EAD乳液连用七天,能使鸽群肝脏的最好的保护。第二,定期给再饲料里加上驰骋品牌特有驰骋补特佳颗粒,每吨料两袋。能使鸽群抗体处于最高的水平。
总结分析:
广大鸽子养殖朋友们一定要注意,这个季节早晚温差大,最容易引起感冒,提醒大家做好疫苗的同时也要做好预防。
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