禽大肠杆菌病是以气囊炎、肝周炎、心包炎为主要症状的一类疾病,禽大肠杆菌病与其他疾病并发给养禽业造成严重的经济损失。
病原性大肠杆菌天然形成了特定的利用铁元素的系统,这一系统由嗜铁体、气杆菌素的合成和气杆菌素特定的外膜蛋白受体的表达两部分组成。细菌的这两种成分在铁饥饿的情况下,均能得到强烈诱导表达。iucB编码33 ku乙酰转移酶;iucC可能编码气杆菌素合成酶;iutA编码74 ku的气杆菌素受体,而且是唯一由质粒编码的气杆菌素受体。气杆菌素对APEC致病作用的影响,国际上两个知名课题组Roy Curtiss Ⅲ领导的课题组和Lisa K.Nolan领导的研究小组得出的结论却不一致。本研究的实施,有利于澄清APEC气杆菌素编码基因iucB、iucC、iutA单个基因及其组合对APEC E058株致病性的影响。
通过RT-PCR鉴定被突变基因及其上下游基因的表达情况,Southern blot鉴定插入抗性基因的单一性。测定生长曲线、体外竞争试验、检测气杆菌素表达以及构建回复株比较在LB/LB-Fe环境中OMPs的表达情况。开展体内竞争试验、体内动态试验、半数致死量(LD50)的测定、SPF鸡胚的致死率试验评价iutA、iucB及iucC基因突变株的致病性,从而得出iutA、iucB及iucC基因与致病性之间的关系。
研究表明,iutA、iucB及iucC单个基因及其组合的突变对APEC E058株的致病性有下降的趋势,但对其致病性的影响未达到显著水平。APEC致病力是多基因调控的,单个或少数基因的突变对菌株致病力的影响可能不显著。
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