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家鸭新型H5N5高致病性禽流感病毒的分离鉴定

2015/12/24 11:13:00 0人评论 2407次浏览 分类:实验室诊断

    禽流感病毒(AIV)为正黏病毒科A型流感病毒属成员,其基因组为8片段单负股RNA,基因重排是流感病毒变异非常重要的机制。普遍认为水禽是禽流感病毒的天然贮存库,且鸭群的分离率明显高于其它水禽品种。研究表明,某些品种的野鸭、家鸭在感染后却几乎不表现临床症状,但这些隐性带毒的个体却能从粪便中排出大量病毒粒子,使同一水域的其它野鸭、家鸭感染,因而被称为H5N1流感“特洛伊木马”。当家鸭受到感染后,又可将病毒传播给与之密切接触的其它家禽、家畜,甚至人类,而且病毒在家鸭与鹅、鸡等家禽之间还可进行双向传播,增加了病毒间发生基因重组的机会。因此,家鸭在流感病毒生态分布中的作用不容忽视。

      本实验室从华东地区表观健康的家鸭体内分离到2H5N5亚型流感病毒,对其生物学特性进行了鉴定。2株病毒的IVPI均大于2.5,对鸡高致病性,在肺脏、心脏、气管、肝脏、胰腺、脾脏均有相应病变产生;对小鼠的半数致死量均大于103.0 ELD50,而小于106.5 ELD50,对小鼠为中等致病力,在肺脏、肝脏、脑部、心脏均有相应病变产生。为进一步追溯新分离到的这2H5N5亚型流感病毒基因来源及与已存在的北美地区H5N5亚型流感病毒的关系,对这2株病毒进行全基因组测序和遗传进化分析,发现2株病毒除了NA基因外,其余7个基因片段均与GenBank中的H5N1亚型流感病毒密切相关。分析HA基因遗传进化树,2H5N5分离株均属于clade2.3.4分支,也就是优势流行株所在分支。NA基因遗传进化树显示,N5流感病毒根据分离地点的不同,可以明显分为欧亚系分支和北美系分支,2H5N5分离株与美洲系毒株分属于两大不同的分支上。对于其它基因,均可看到H5N5分离株与H5N1病毒亲缘关系很近。

      研究表明,分离到的2H5N5禽流感病毒,为基因重排产物,近年来流行于我国的H5N1亚型禽流感病毒可能为其提供了重要的病毒骨架,2个分离株之间也可能存在基因片段的交换。由于这2个分离株及其可能的母本病毒均是从健康家鸭体内分离到的,且这几个病毒株间有着非常相似的时空分布,因此,推测新出现的这2H5N5病毒很可能是在家鸭体内发生了基因重组过程,家鸭可能为新型流感病毒的产生提供了一个非常适宜且重要的场所。

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