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实验室技术:药敏试验--营养琼脂的制作

2014/1/18 16:17:21 0人评论 2049次浏览 分类:实验室诊断

         1、用高压锅。一般 31451000ml蒸馏水于锥形瓶中,12115分钟。要注意过121则放气,不能等到自放,温度就太高了,有可能将营养琼脂破坏。

        2、放气后维持相近温度,可断电再加电。

        3、到时间后,将液状的营养琼脂倒入已消好毒的平皿中,将其底铺全,加厚至3~4cm厚,静置,待其凝固,放入冰箱冷藏备用。注意往平皿中倒琼脂时,平皿盖打开时,口应留小一些,尽量避免空气中的细菌进入。

        4、一般每100ml5个左右的琼脂平皿。

        5、做法氏囊、鸡白痢琼扩试验时,在打孔后,要将平皿底上烤 一下,让其下部都融合。

        6、正式程序是:

1)用铂丝(先用酒精灯烧一下)接种棒直接从病禽肝脏提取细菌,放到肉汤培养基中24~48小时

2)从肉汤中提取液体划线到平皿上,要多划一些线,将药敏片贴在已划线的平皿上,放入37培养箱中24小时3)看结果,抑菌圈越大该药效果越好。

        7、现在的步骤是用病禽的肝脏直接做。先将手术剪在酒精灯上烧一下,用剪子剪开肝脏,使其切面直接接触平皿上的琼脂,再切再涂。然而后用镊子将药敏片放上去,24小时后看结果,判定同上。

         8、体外试验与体内试验不完全一致

         9、厌氧菌问题,培养基问题。鸡白痢沙门氏菌问题(要用一些特殊的培养基,如SS琼脂、亚硝酸铋琼脂等)。要注意不同的培养基和不同厂子的琼脂可能操作要求不同,要注意产品说明。

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